Strain Data Sheet

RBRC10465

Strain Information

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BRC No.RBRC10465
TypeCRISPR/Cas9 (Transgene)Cartagena
SpeciesMus musculus
Strain nameSTOCK Amy1<em1(luc/mVenus)Matam>
Former Common nameAmy1
H-2 Haplotype
ES Cell line
Background strain
Appearance
Strain development井上直和・関亦正幸（福島県立医科大学）、関亦明子（山形大学）らによって２０１８年に独自開発し、以降、当研究室にて維持。B6D2F1マウス受精卵にCRISPR/Cas9ゲノム編集技術を用いてNanoLucルシフェラーゼ遺伝子とmVenus遺伝子をT2Aペプチドで連結したレポーター遺伝子をAmy1遺伝子座にノックインして作出。ファウンダーマウスをICRマウスと３世代交配し、その後、兄妹交配にてノックインホモマウスとして維持。野生型とマクロな解剖所見に違いなし。ホモマウスも正常に生育、交配できる。分泌液中にNanoLucルシフェラーゼ活性あり。唾液腺組織でmVenusを検出。
Strain descriptiona-アミラーゼ１遺伝子の分泌シグナルペプチドの下流にルシフェラーゼ遺伝子(NanoLuc)とmVenus遺伝子をT2Aで連結したNluc-3xFLAG-T2A-mVenus-BGHpAをノックインしたレポーター挿入マウス。これらレポーター遺伝子はa-アミラーゼ１遺伝子プロモーター制御下に発現する。そのため、ルシフェラーゼは細胞外に分泌されるため唾液分泌を定量化でき、mVenusは細胞質内に局在するためa-アミラーゼ１遺伝子発現細胞を検出できる。
Colony maintenance
References

Health Report

Examination Date / Room / Rack2022/06/13Room:3-5Rack:C

Gene

Gene info
Gene symbolGene nameChr.Allele symbolAllele nameCommon namesPromoter
Amy1amylase 1, salivary3Amy1<em1(luc/mVenus)Matam>endonuclease-mediated mutation, Masayuki Sekimata

Gene symbolGene nameChr.Allele symbolAllele nameCommon namesPromoter
FLAG3xFLAG tag (synthetic)3FLAG

Gene symbolGene nameChr.Allele symbolAllele nameCommon namesPromoter
GHGrowth hormone polyA3GH

Gene symbolGene nameChr.Allele symbolAllele nameCommon namesPromoter
NanoLucluciferase (Oplophorus gracilirostris)3NanoLuc

Gene symbolGene nameChr.Allele symbolAllele nameCommon namesPromoter
T2AThosea asigna virus 2A peptide (insect)3T2A

Gene symbolGene nameChr.Allele symbolAllele nameCommon namesPromoter
mVenusYellow Fluorescent Protein (Aequorea victoria)3mVenus

Ordering Information

供与核酸Oplophorus gracilirostris NanoLuc cDNA, synthetic FLAG (3xFLAG tag), Thoseaasigna virus 2A peptide (T2A), Aequorea victoria mVenus (variant of enhanced yellow fluorescent protein) cDNA, Bos taurus GH (Growth hormone polyA), mouse Amy1 genomic DNA
Research applicationFluorescent Proteins/lacZ System
提供条件条件を付加する。利用者は提供承諾書を用いて、事前に寄託者の承諾を得る。
研究成果の公表にあたって寄託者の指定する文献を引用する。(will be announced.)
研究成果の公表にあたって謝辞の表明を必要とする。
利用者が本件リソースを使用して得られた研究成果に基づき特許等の申請、及び事業活動を行う場合は、寄託者と別途協議を行う。研究成果の公表にあたってVenusの開発者である宮脇敦史先生への謝辞の表明並びに指定する文献を引用する。Nat. Biotechnol., 20, 87-90 (2002).
Depositor関亦　正幸（福島県立医科大学）
Strain Status凍結胚のアイコン凍結胚
凍結精子のアイコン凍結精子
Strain Availability凍結胚より作出したマウスを2~4ヶ月以内に提供可能
凍結精子を1ヶ月以内に提供可能
凍結胚を1ヶ月以内に提供可能
Additional Info.Necessary documents for ordering:
  1. Approval form (Japanese / English)
  2. Order form (Japanese / English)
  3. Category I MTA: CRISPR/Cas9 genome edited bioresources (Japanese / English)
  4. Acceptance of responsibility for living modified organism (Japanese / English)

Genotyping protocol -PCR-

BRC mice in Publications

No Data